昆蟲蛋白研究在當(dāng)今社會是比較普遍的。 相比于大腸桿菌，昆蟲細(xì)胞能完成更復(fù)雜的蛋白翻譯后修飾，表達(dá)出更接近天然構(gòu)象的功能性蛋白。
但是蛋白表達(dá)過程是復(fù)雜的，每一步都至關(guān)重要，尤其在蛋白提取實驗上，選對方法很重要。
下面一起看看昆蟲蛋白提取的方法：
實驗步驟
1.樣品準(zhǔn)備：收獲經(jīng)離心濃縮的昆蟲細(xì)胞沉淀，用預(yù)冷的裂解緩沖液（含蛋白酶抑制劑）量懸，制成均勻的細(xì)胞懸液。
2.儀器準(zhǔn)備與參數(shù)設(shè)置：將凈信高壓均質(zhì)機連接已經(jīng)預(yù)冷的冷水機（需要提前半小時預(yù)冷）以維持低溫環(huán)境。將細(xì)胞懸液加入料杯。設(shè)定破碎壓力（例如400 bar）和循環(huán)次數(shù)（通常1-3次）。
3.細(xì)胞均質(zhì)完成后，及時收集樣品，放置在冰箱里，
4.后處理與分析：通過SDS-PAGE、Western Blot、ELISA或活性測定等方法，對目標(biāo)蛋白生物活性進行綜合分析。
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